Özet:
İdrarda hidroksiprolin tayini için yüksek performanslı sıvı kromatografi
cihazında iki farklı dedektörle iki farklı yöntem oluşturulmuş ve çalıştırılmıştır.
Yöntemlerin en önemli basamağı türevleme olduğu için en uygun türevleme süresi,
sıcaklığı ve pH değeri araştırılmıştır.
Ultraviyole dedektörle yapılan ölçümlerde türevleme için en uygun türevleme
süresi 20 dakika, türevleme sıcaklığı 90 °C ve türevleme pH’sı 9,5 olarak bulunmuştur.
Elektrokimyasal dedektörle yapılan ölçümlerde ise en uygun türevleme süresi 10
dakika, türevleme sıcaklığı 80 °C ve türevleme pH’sı 12,5 olarak bulunmuştur. Bu
şartlar altında yapılan analizlerde ultraviyole dedektör için kurulan yöntemde
hidroksiprolinin alıkonma süresi 4,6 dakika, elektrokimyasal dedektörde 3,2 dakika
olarak tespit edilmiştir. Ayrıca, yöntemlerin ve cihazın gün içi ve günler arası
tekrarlanabilirlik çalışmaları da yapılmıştır. İdrar numunelerinde geri kazanım verimi
ultraviyole dedektör için 108±6; elektrokimyasal dedektör için de 102±7 bulunmuştur.
Geliştirilen yöntemler sigara içen ve içmeyen bireylerden toplanan idrar
örneklerindeki hidroksiprolin düzeylerini belirlemek için kullanılmıştır. Bu sayede
sigara içiminin hidroksiprolin düzeyine etkisi incelenmiştir. Sigara içen bireylerle sigara
kullanmayan bireylerin hidroksiprolin/kreatinin oranı karşılaştırılmış ve her iki
dedektörle yapılan analizlerde istatistiksel olarak anlamlı bir farklılık olduğu tesbit
edilmiştir.
Açıklama:
İdrarda hidroksiprolin tayini için yüksek performanslı sıvı kromatografi
cihazında iki farklı dedektörle iki farklı yöntem oluşturulmuş ve çalıştırılmıştır.
Yöntemlerin en önemli basamağı türevleme olduğu için en uygun türevleme süresi,
sıcaklığı ve pH değeri araştırılmıştır.
Ultraviyole dedektörle yapılan ölçümlerde türevleme için en uygun türevleme
süresi 20 dakika, türevleme sıcaklığı 90 °C ve türevleme pH’sı 9,5 olarak bulunmuştur.
Elektrokimyasal dedektörle yapılan ölçümlerde ise en uygun türevleme süresi 10
dakika, türevleme sıcaklığı 80 °C ve türevleme pH’sı 12,5 olarak bulunmuştur. Bu
şartlar altında yapılan analizlerde ultraviyole dedektör için kurulan yöntemde
hidroksiprolinin alıkonma süresi 4,6 dakika, elektrokimyasal dedektörde 3,2 dakika
olarak tespit edilmiştir. Ayrıca, yöntemlerin ve cihazın gün içi ve günler arası
tekrarlanabilirlik çalışmaları da yapılmıştır. İdrar numunelerinde geri kazanım verimi
ultraviyole dedektör için 108±6; elektrokimyasal dedektör için de 102±7 bulunmuştur.
Geliştirilen yöntemler sigara içen ve içmeyen bireylerden toplanan idrar
örneklerindeki hidroksiprolin düzeylerini belirlemek için kullanılmıştır. Bu sayede
sigara içiminin hidroksiprolin düzeyine etkisi incelenmiştir. Sigara içen bireylerle sigara
kullanmayan bireylerin hidroksiprolin/kreatinin oranı karşılaştırılmış ve her iki
dedektörle yapılan analizlerde istatistiksel olarak anlamlı bir farklılık olduğu tesbit
edilmiştir.